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免疫沉淀实验

发布时间:2021-01-13      点击次数:298

一、服务介绍

免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗体与抗原间的特异性结合特性,将抗原(我们感兴趣的靶蛋白)-抗体复合物从样品中分离出来,达到初步分离纯化靶蛋白的目的。之后,样品可以再进行Western blot 分析。

二、实验原理

免疫沉淀是利用抗原与抗体免疫反应达到纯化,定性检测蛋白的目的,即在蛋白质提取液中加入与抗原(靶蛋白质)特异性结合的抗体,抗体与抗原结合后形成免疫复合物,再与蛋Protein A/G 或二抗偶联的琼脂糖珠子孵育,通过离心得到免疫复合物再经过纯化,洗脱后进行SDS-PAGE及WB分析,从而实现纯化目的蛋白质、定性检测抗原或抗体。

三、免疫沉淀实验流程:

1.样品裂解

细胞培养物的裂解或组织裂解

2.裂解物预清除

3.免疫沉淀

4.SDS - PAGE 电泳

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