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小鼠脾脏单细胞悬液的制备方法

更新时间:2024-06-14      点击次数:307

1. 8周龄C57BL/6小鼠摘眼球放血。

2. 在75%的酒精中,浸泡5min。

3. 无菌状态下取脾脏。

4. 取一干净10cm大皿,放入无菌的70um滤网,将脾脏置于滤网上,加入2ml培养基。

5. 用研磨棒轻轻研磨脏器,将脾脏组织研磨成单细胞状态,直到只剩下脏器的结缔组织为止。

6. 研磨时动作应轻柔,用力过大可导致细胞死亡。

7. 弃去滤网和滤网上的结缔组织,收集平皿内的细胞悬液,400g4min离心沉淀。

8. 用PBS重悬沉淀,就可以进行后续实验。


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