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大鼠髓核细胞的原代培养总结会

更新时间:2024-04-25      点击次数:124

2024年4月18日,周四,公司组织,由实验室主管刘博主导,实验室全体成员参与,对大鼠髓核细胞的原代培养相关知识点,进行了培训与交流。本次会议,主要针对小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植模型,刘博就实验方法深入进行了讲解,实验室人员展开激烈的讨论。以下为讨论内容的总结:

 

1.脱臼法处死SD大鼠,剃毛,75%酒精浸泡5min。

2.从尾椎处剪开皮肤,取出腰椎。用含2%双抗的PBS冲洗3-5次。

3.分离椎节,切开纤维环分离凝胶状髓核,将凝胶状髓核置于PBS中冲洗3次,去除血迹,剪碎髓核组织呈1mm3大小,移至离心管后加入5倍体积的1.5%Ⅱ型胶原酶,37℃摇床消化2h。

4.消化结束,20%FBS终止消化,100um滤网过滤,1000r/min离心5min,弃上清后DMEM/F12重悬,按1×105/ml接种于培养板,加入含1%双抗和 15% FBS 的 DMEM/F12,置于37 ℃细胞培养箱中培养。

5.4d后换液,以后每3天换液 1 次,细胞达 90% 融合后传代。

 

本次会议,提升公司对小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植模型的重要知识点的认知,针对相关实验,更好的把控实验质量,提高了公司在这方面的经验积累。


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