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Transwell细胞侵袭

简要描述:Transwell细胞侵袭实验的实验步骤:配制结晶紫染液 transwell侵袭孔的制备 细胞离心 下室加培养基 上室接种细胞染色。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍

Transwell细胞侵袭作为一项实验技术,其主要材料是transwell小室,其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,杯子底层有一张具有通透性的膜,这层膜带有微孔,孔径大小从01-12um不等。根据不同需要有不同材料,般常用的是聚碳酸酯膜。将transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室。上室装上层培养液,下室内装下层培养液,二者以transwel小室底部的聚碳酸酯膜相隔。细胞种在 上室可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。运用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,可以进行细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移细胞侵袭等各种研究。

Transwell细胞侵袭实验
常用8.0、12.0um孔径的膜,原理与transwell迁移实验类似。上室种细胞(一般为肿瘤细胞),下室加入FBS或者某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室运动。但是与迁移实验不同的是,本实验中聚碳酸酯膜上室侧铺有层基质胶 ,用以模拟体内细胞外墓质 细胞要想穿过透性膜进入下室 ,需要先分泌基质金属蛋白酶( MMPS )将基质胶降解,方能通过聚 碳酸酯膜。对进入下室的细胞进行计数即可反应细胞的侵袭能力。

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