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细胞MTT实验

简要描述:细胞MTT实验:MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍

MTT法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下,外源性MT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒( Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在570nm(参比波长630m)波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MT结晶形成的量与活细胞数成正比。

注意事项:
MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度在0-0.7 范围内。
MTT一般现用现配,过滤后4℃避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃长期保存,避免反复冻融,小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。
MTT有致癌性,用的时候注意防护,配成的MTT需要无菌。
配制MTT时用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60℃水浴助溶。
 

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