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细胞毒性实验

简要描述:细胞毒性实验:细胞毒性(cytotoxic)是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。有时需要进行特定物质细胞毒性的检测,比如药物筛选。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍


细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测,常用以下几种方法:
MTT、XTT法:利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化,然后通过酶标仪进行检测
LDH的方法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性
其它酶方法:如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
细胞增殖能力分析试剂盒
原理:正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态
荧光素发光法细胞生存能力检测
原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中,AK具有激活ADP生成ATP。当细胞受损后,细胞膜发生破损,AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光,通过化学发光仪可以定量进行检测。
LDH法细胞毒性检测
原理:LDH(乳酸脱氢酶)是一种稳定的蛋白质,存在于正常细胞的胞质中,一旦细胞膜受损,LDH即被释放到细胞外; LDH催化乳酸形成丙酮酸盐,和INT(四唑盐类)反应形成紫色的结晶物质,可通过500nm酶标仪进行检测。通过检测细胞培养上清中LDH的活性,可判断细胞受损的程度
 

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