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上海实验-细胞周期实验

简要描述:上海实验服务-细胞周期实验是上海达为科生物的基础服务项目之一,由细胞平台经验丰富的实验人员操作完成。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍

  上海实验细胞周期实验是上海达为科生物的基础服务项目之一,由细胞平台经验丰富的实验人员操作完成。
 
  (1)收集对数生长期细胞:弃除旧培养基,用PBS洗涤细胞加入适量胰酶进行消化。加入新鲜的培养基吹打细胞,并将细胞收集于标记好的对应离心管中,室温1000 rpm离心5 min弃除.上清液。
 
  (2)洗涤细胞:用预冷的PBS重悬上述细胞沉淀,室温1000 rpm离心5 min将上清液弃除。
 
  (3)固定细胞:将细胞用0.5 ml预冷的PBS溶液重悬,加入预冷的70%乙醇溶液在4°C固定过夜。
 
  (4) PI染色细胞:加入10μl RNase ( 10mg/ml) ,置37 C、5% CO2、饱和湿度恒温培养箱孵育30min,运用冰浴终止RNase A酶作用;再加入10μ1溴化乙锭(PI, 1mg/ml) 染色,置37 C、5% CO2、饱和湿度恒温培养箱孵育30min.
 
  (5)流式细胞仪检测,分析PI荧光的直方图。
 

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