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操作步骤
(1)所有细胞培养试剂和Transwell chamber 放在37°C温育;
(2)待测细胞培养至对数生长期，消化细胞，用PBS和无血清培养基先后洗涤一次，用无血清培养基悬浮细胞，计数，调整浓度为2X10* /ml;
(3)在下室(即24孔板底部)加入600-800μ 1含10%血清的培养基，上室加入100- 150μ 1细胞悬液，继续在孵箱培养24小时;
(4)用镊子小心取出chamber,吸干上室液体，移到预先加入约800μ 1甲醇的孔中，室温固定30分钟;
(5)取出chamber， 吸千上室固定液，移到预先加入约800μ 1 Giemsa 染液的.孔中，室温染色15-30分钟;
(6)轻轻用清水冲洗浸泡数次，取出chamber, 吸去上室液体，用湿棉棒小心擦去_上室底部膜表面上的细胞;
(7)用小镊子小心揭下膜，底面朝上晾干，移至载玻片上用中性树胶封片;
(8)显微镜下取9个随机视野计数，统计结果。
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