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动物肿瘤组织病理切片

简要描述:动物肿瘤组织病理切片是达为科生物的基础服务项目之一,由病理平台经验丰富的实验员操作完成。

  • 更新时间:2021-11-12
  • 浏览次数:235

详细介绍

1取材和固定

切取组织时应使用锋利的刀、剪,切取组织块时,从刀的根部开始向后拉动切开组织。组织块的厚度约为0.2~0.3cm,大小为1.5cm×1.5cm x 0.3cm为宜。取好的组织块置于10%福尔马林中固定48小时;

2洗涤与脱水

将固定后的组织用流水冲洗,去除残留的固定液和杂质。不同浓度的乙醇逐级脱水,50%、70%、85%、95%直至纯酒精(无水乙醇),每级2小时。脱水必须在有盖的瓶中进行,以防止高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不彻底。需要保存的材料可脱水至70%乙醇时停留其中,如需长期保存,可加入等量的甘油。

3透明

将组织块置入纯乙醇和二甲苯的等体积混合液中2小时,再进入纯二甲苯两小时,再一次纯二甲苯两小时;材料经过透明,会显示出前一步脱水的效果如何,若脱水彻底,组织则显现透明状态,如组织中有白色云雾状,说明脱水不净,须返工处理,但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明时,应避免其挥发和吸收空气中的水分,并保持其无水状态。

4浸蜡

浸蜡须在恒温箱中进行。先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1~2小时,再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍各3小时左右;

5包埋

包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。具体做法是;先准备好纸盒,将熔蜡倒入盒内,迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部,切面朝下,再轻轻提起纸盒,平放在冷水中,待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中,使其迅速冷却凝固,30min后取出。

6切片

切片前将蜡块在-20度冰箱中至少放置30min,以增加硬度。将切片刀装在刀片机的刀架上并固定紧,固定蜡块底座或蜡块,调整蜡块与刀至合适位置,刀刃与蜡块表面呈5度角。调整切片机上的切片厚度为4-7μm,然后切片。

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