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细胞流式单标实验

简要描述:细胞流式单标实验:是达为科生物较为成熟的一项技术服务之一,由细胞平台经验丰富的实验人员操作完成。

  • 更新时间:2022-12-23
  • 浏览次数:555

详细介绍

准备单细胞悬液:淋巴组织、骨髓、血液或培养的细胞。
用冰染色缓冲液洗细胞2次,离心细胞,用冰染色缓冲液重悬细胞,使终浓度为2×107细胞/ml。
各取50ul(106细胞)细胞悬液到2个圆底的Ep管中。
根据抗体说明书在其中1个Ep管中加入合适的抗体量,另外1个加入同型对照抗体,冰上避光孵育20分钟(建议每5分钟轻轻混匀,以免细胞沉积)。根据荧光抗体的亲和力适当延长染色时间。
用1ml染色缓冲液洗2次去除未结合的抗体,300×g离心5分钟,每次离心后小心吸取上清。
用适量染色缓冲液(如500ul)重悬细胞。
 流式细胞仪分析染色结果(不超过4小时)。如果暂时无法检测,也可以将染色后的细胞用4%多聚甲醛固定后,避光储存在4度。固定后的细胞可以保存多一个星期。

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