详细介绍
通过茜素红染色检测细胞成骨分化
实验原理
1、成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来,“钙结节”,鉴定钙结节的染色方法常用茜素红染色法。
2、茜素红:茜素磺酸钠,茜素S,茜素红S,茜素胭脂红,1,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠,1,2-二羟基蒽醌3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯。1%水溶液pH为2.15,其水溶液呈前黄褐色,加盐酸后变为黄色,加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成有色化合物,能与锆、钍、铝、钛及钙发生显色反应。
茜素红染色实验步骤:
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯I20分钟,二甲苯Ⅱ20分钟,无水乙醇I5分钟,无水乙醇Ⅱ5分钟,75%酒精5分钟,自来水洗。
2、茜素红染色:切片用茜素红染液染5-10分钟,自来水洗,将切片放置烤箱内烤干。
3、透明封片:切片入干净的二甲苯透明5分钟,中性树胶封片。
4、显微镜镜检,图像采集分析。
结果判读:钙盐沉积出呈深红色,背景淡红色或者近无色。
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