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大鼠骨质疏松模型

简要描述:骨质疏松模型:骨质疏松症(osteoporosis)是由于多种原因导致的骨密度和骨质量下降,骨微结构破坏,造成骨脆性增加,从而容易发生骨折的全身性骨病。

  • 更新时间:2022-12-28
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详细介绍

骨质疏松模型的实验服务介绍:

1 卵巢切除模型

(1)复制方法  雌性实验大鼠按40mg/kg体重的剂量经腹腔注射麻醉,无菌下腹部正中切口,钝性分离腹肌腹膜后进腹,丝线结扎卵巢并摘除。缝合切口前腹腔内注射,造模后大鼠常规饲养,自由饮水和进食。

(2)模型特点  卵巢切除后模型大鼠血浆雌激素(E2)含量显著下降,股骨中点骨皮质指数也明显下降,骨量和骨质量也明显下降。镜下病理组织学观察显示,骨组织切片中骨小梁断裂,排列稀疏,形态结构完整性差。

(3)比较医学  骨质疏松是临床上老年人常见的疾病之一,妇女绝经后好发此病;随着绝经后时间延长,中老年妇女骨质疏松发病率可大幅度上升,表明卵巢分泌的雌激素对骨质疏松的发生和发展有重要影响。大鼠去卵巢后,其体内雌激素分泌减少,使其对破骨细胞的抑制减弱,骨吸收大于骨形成,骨骼呈高转换状态,骨量不能保持平衡,导致骨丢失增加。镜下表现为骨小梁的面积下降、数量减少、分离度增加。以往研究表明,年龄为3~9月龄区间的大鼠适合复制骨质疏松模型,尤其是6月龄大鼠已达峰值骨量。大鼠年龄过小,机体内因生长期骨量显著增长会掩盖去卵巢的骨量丢失;而12个月龄后大鼠由于开始进入老龄期,机体内会出现老年性骨量丢失,从而影响实验结果观察。到目前为止,采用卵巢切除大鼠复制的骨质疏松模型,是WHO和美国FDA推荐的研究绝经后骨质疏松症的模型。

2 维甲酸模型

(1)复制方法  3个月龄雌性大鼠每天按70mg/kg体重的剂量口服维甲酸,连续14d,随后14d维甲酸改为生理盐水。动物常规饲养,自由饮水及进食。于造模开始后第29日处死动物,取其胫骨于固定液中固定,常规脱钙,石蜡包埋,作连续切片,光镜下观察。

(2)模型特点  口服维甲酸3d后,模型大鼠食量明显减少;至第14日时动物体重明显减轻,活动减少,并可见拱背竖毛。模型大鼠胫骨近心段松质骨(骨小梁)骨量及形态发生明显改变,骨小梁面积百分数、密度显著减少,骨小梁间隙增大。模型动物骨组织切片形态计量结果显示,胫骨中段密质骨面积百分数也明显减少,骨髓腔面积百分数增大,反映破骨细胞活性与功能的骨内膜面骨吸收周长百分数明显增高。本模型制作方法简便,造模时间短,模型成功率高,动物骨质疏松表现典型,易于开展给药观察。

(3)比较医学维甲酸是维生素的衍生物,具有与维生素相似的药理作用,临床上主要用于各种皮肤科疾病的治疗,但其伴有骨质疏松副作用。过去的研究表明,维甲酸能激活机体内破骨细胞促进骨吸收,但对成骨细胞活性无抑制作用,对骨形成及骨基质的矿化过程也无明显影响,终使机体内骨重建处于骨吸收大于骨形成的负平衡状态,从而导致动物出现骨质疏松。本方法建立的骨质疏松模型病理形态改变非常典型,镜下表现为骨小梁稀疏,骨皮质变薄,骨髓腔扩大;但由于其造模机制方面的原因,可引起模型动物性腺受损及脾脏、肾上腺发生代偿性肥大,所以其在研究的实用性方面不如卵巢切除方法建立的骨质疏松模型。


分子实验平台:高效运作了qRT-PCR、Western blot、双向电泳技术、分子克隆与质粒构建、流式细胞仪检测、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝胶电泳迁移实验、酶联免疫吸附测定、外泌体抽提及鉴定等实验。


基因组学平台:可以完成甲基化检测、基因芯片分析、高通量测序等实验。


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