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iTRAQ

简要描述:iTRAQ:是一种相对和绝对定量的同位素标记技术,广泛应用于蛋白质组学研究中。iTRAQ技术通过标记蛋白质或肽段,实现蛋白质的定量分析,从而揭示蛋白质在生物过程中的动态变化。

  • 更新时间:2024-03-22
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详细介绍

iTRAQ工作原理

iTRAQ技术的核心是利用同位素标记试剂,对蛋白质样本进行标记。这些标记试剂由两部分组成:平衡区和报告区。平衡区保证标记后的肽段具有相同的质量,而报告区在质谱分析时产生不同的碎片离子,用于定量分析。

iTRAQ操作流程

iTRAQ技术的操作流程主要包括样本处理、酶切、标记、混合、分离和质谱分析等步骤。其中,样本处理是实验的基础,包括蛋白质的提取、纯化和浓缩等;酶切是将蛋白质切割成肽段,为后续的标记提供便利;标记是将iTRAQ试剂与肽段结合,形成标记肽段;混合是将不同样本的标记肽段混合在一起,进行质谱分析;分离是通过液相色谱将混合肽段进行分离,以提高质谱分析的准确性;质谱分析是通过质谱仪对肽段进行分析,获取蛋白质的定量信息。


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