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Transwell小室跨膜电阻实验

简要描述:Transwell小室跨膜电阻实验简介

Transwell小室跨膜电阻(Transepithelial Electrical Resistance, TEER)实验是一种常用于评估细胞膜完整性和细胞层渗透性的技术。TEER值能够反映细胞膜的电阻,从而间接衡量细胞层的紧密连接程度。在体外细胞模型中,如血脑屏障(BBB)模型,TEER值是评价模型功能的重要参数。

  • 更新时间:2024-10-16
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详细介绍

Transwell小室跨膜电阻实验简介

Transwell小室跨膜电阻(Transepithelial Electrical Resistance, TEER)实验是一种常用于评估细胞膜完整性和细胞层渗透性的技术。TEER值能够反映细胞膜的电阻,从而间接衡量细胞层的紧密连接程度。在体外细胞模型中,如血脑屏障(BBB)模型,TEER值是评价模型功能的重要参数。


Transwell小室跨膜电阻实验步骤和关键要点

  1.细胞培养:选择合适的细胞系进行培养,以构建具有特定功能的细胞层,如内皮细胞或上皮细胞。

  2.Transwell小室准备:使用含有透膜的Transwell小室,透膜通常由聚碳酸酯(PC)或聚四氟乙烯(PTFE)制成,孔径大小根据实验需求选择。

  3.细胞接种:将细胞接种到Transwell小室的上室内,使其附着并生长形成单层细胞。

  4.培养条件优化:确保提供适宜的培养条件,包括温度、CO2浓度和培养基,以促进细胞的正确分化和紧密连接的形成。

  5.TEER值测量:使用专门的TEER测量仪器,如EndOhm Chamber,来测量细胞层的电阻值。在测量前,确保Transwell小室和电极清洁,避免污染和损坏。

  6.数据记录和解析:记录TEER值,并根据实验设计进行适当的数据处理和解析。TEER值通常以Ω·cm²表示,较高的TEER值表明细胞层的屏障功能较强。


实验技巧和常见问题解决方案

  1.细胞状态和成熟度:确保细胞达到适当的分化状态和成熟度,这可能需要进行更长时间的培养或使用特定的培养条件和培养基。

  2.细胞-基质相互作用:优化细胞与透膜的相互作用,可能需要预涂层透膜,如使用胶原蛋白或胶原蛋白类似物等。

  3.培养条件和培养基:提供细胞所需的适当培养条件和培养基,以支持细胞生长和屏障功能的形成。

  4.培养时间:继续培养细胞并定期测量TEER,观察其动态变化,以获得最佳的实验结果。

  5.质量控制:确保实验中使用的Transwell小室和测量设备的质量良好,并按照操作说明正确操作。


时效性信息

根据最新的搜索结果,有关Transwell实验的讨论和操作分享仍然是科研人员关注的话题。例如,有研究者分享了使用bEnd.3细胞构建体外BBB模型时的TEER值范围,以及可能影响电阻值的因素和解决方案。此外,还有关于Transwell实验操作的详细步骤和技巧的分享,这些信息对于设计和执行TEER实验非常有帮助。在进行实验时,应参考这些最新的实验操作和讨论,以确保实验的准确性和可靠性。


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