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分子实验PCR具有的优点和电泳缓冲液的选择

发布时间:2021-03-17      点击次数:218
   聚合酶链式反应,简称PCR,是一种将几个或几十个拷贝数DNA段扩增至上百万份拷贝的方法,这是迄今为止为重要的技术之一。PCR技术的影响不仅仅局限于生物科学领域,几乎人人都可以感受到PCR所带来的改变,在亲子鉴定以及犯罪调查中PCR技术便有广泛应用。而人类基因组计划,这一具有划时代意义的测序工程,如果缺少了PCR技术手段则根本无法开始。
  分子实验-PCR:普通电泳PCR实验的原理是DNA分子在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同,表现为不同的迁移率而被分开。
  分子实验-PCR具有的优点:
  1、封闭反应,无需PCR后处理。
  2、特异性强,灵敏度高。
  3、采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确。
  4、定量范围宽,可达到10个数量级。
  5、仪器在线式实时检测,结果直观,避免人为判断。
  6、可实现一管双检或多检。
  7、操作安全,缩短时间,提高效率。
  分子实验电泳缓冲液选择:
  电泳缓冲液为具有缓冲能力的离子溶液,通常在凝胶中使用,以保证电流流动同时防止pH值变化。电泳过程中,由于电子流动,负极逐渐偏向碱性,正极逐渐偏向酸性,从而导致水电解和pH值改变。氢气和氧气的释放会引起电极起泡,这是凝胶运行的迹象。理想情况下,电泳缓冲液和凝胶制备缓冲液应相同,以确保有效的导电性。电泳缓冲液的选择取决于样品大小、运行时间和后电泳过程,其中醋酸盐和硼酸是常用的两种缓冲液。
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