成年小鼠的灌流实验

进行实验动物灌流是获得良好的形态学观察结果以及保存脑、肾、心脏和其他许多器官所必需的。对于未经训练的实验人员，初次进行灌流可能会失败，故建议首先用一些对照实验动物练习，以熟悉此过程。

基本方案

实验材料       

小鼠

试剂、试剂盒       

PBS

仪器、耗材     

23-G针头注射管解剖器械

实验步骤       

1.  一支针管吸满1×PBS，另一支吸4%PFA固定液（4℃），搁置待用。

2.  在袋中用CO2气体处死小鼠。停止吸呼后，立刻背朝下放平小鼠，小心剖开胸腔防止过多出血，小心并迅速切开肋骨，剪去横隔膜，暴露心脏。

3.  小心将吸有1×PBS的针管刺入左心室，剖开右心室排液。缓慢但持续将1×PBS灌入心脏（见图一、如灌流正常，血液丰富器官，如肝脏，脾脏和肾脏将转呈灰白色）。

4.  当多数血液已流出后，拨去1×PBS的针管将吸有4%PFA固定液的针管插入左心室同一进针处，以20 ml 固定液缓慢灌流小鼠。

5.  灌流后，剖下器官或组织，放入盛有4%PFA固定液的做好标记玻璃瓶中，于冰上保存。