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结直肠癌类器官原代培养总结会

更新时间:2024-05-23      点击次数:92

2024年58日,周,公司组织,由实验室主管刘博主导,实验室全体成员参与,对结直肠癌类器官原代培养相关知识点,进行了培训与交流。本次会议,主要针对结直肠癌类器官原代培养,就以下内容展开了交流

1.组织4℃条件下从医院取回。

2.消毒取样的15ml管,取出组织,放到10ml大皿中。

3.用含4抗的PBS溶液浸泡,清洗组织。

4.再用组织缓冲液浸泡、清洗三遍。

5.将组织剪成1mm3大小的组织块,转移到15ml管中消化。

6.在37℃水浴锅中,消化15min。

7.取少量液体在显微镜下观察,看到较多的单细胞和较少的细胞簇后,终止消化。

8.用100μm筛过滤,然后300g4℃离心5min,移去上清。

9.重悬沉淀,转移到2ml离心管中,300g4℃离心5min,移去上清。

10.估算沉淀的细胞量,以1:25的比例添加基质胶,重悬。

11.24孔板铺板,冰上操作,每孔点胶25ul。

12.铺板后,放到37℃细胞培养箱中15min成胶。

13.然后每孔添加600ul 结直肠癌类器官培养基,放到37℃细胞培养箱中。

 

本次会议,提升公司对结直肠癌类器官原代培养的重要知识点的认知


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