2024年5月8日，周三，公司组织，由实验室主管刘博主导，实验室全体成员参与，对结直肠癌类器官原代培养的相关知识点，进行了培训与交流。本次会议，主要针对结直肠癌类器官原代培养，就以下内容展开了交流：

1.组织4℃条件下从医院取回。

2.消毒取样的15ml管，取出组织，放到10ml大皿中。

3.用含4抗的PBS溶液浸泡，清洗组织。

4.再用组织缓冲液浸泡、清洗三遍。

5.将组织剪成1mm3大小的组织块，转移到15ml管中消化。

6.在37℃水浴锅中，消化15min。

7.取少量液体在显微镜下观察，看到较多的单细胞和较少的细胞簇后，终止消化。

8.用100μm筛过滤，然后300g4℃离心5min，移去上清。

9.重悬沉淀，转移到2ml离心管中，300g4℃离心5min，移去上清。

10.估算沉淀的细胞量，以1:25的比例添加基质胶，重悬。

11.24孔板铺板，冰上操作，每孔点胶25ul。

12.铺板后，放到37℃细胞培养箱中15min成胶。

13.然后每孔添加600ul 结直肠癌类器官培养基，放到37℃细胞培养箱中。

本次会议，提升公司对结直肠癌类器官原代培养的重要知识点的认知