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细胞划痕检测

简要描述:细胞划痕检测(wound healing)法是简捷测定细胞迁移运动和修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍

一、实验原理
细胞划痕(wound healing)法是简捷测定细胞迁移运动和修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞的生长迁移能力,实验通常需设定正常对照组和实验组,实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等的组别,通过不同分组之间的细胞对于划痕区修复能力的不同,可以判断各组细胞的迁移与修复能力。
二、实验步骤
1、 所有要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min. .
2、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,大约每隔0.5-1cm一道,横穿过孔,每孔至少穿过5           条线。

3、在空中加入约5X105个细胞(具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满),37C培养箱培              养。

4、第二天用10μ1枪头比着直尺,与标记线垂直的方向划两条平行线,枪头要垂直,不能倾斜。
5、用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。
6、放入37°C 5% CO2培养箱,按0、6、12、24h倒置显微镜观察,拍照。

 

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