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小鼠黑色素瘤模型

简要描述:小鼠黑色素瘤模型是达为科生物较为成熟的动物模型之一,由动物平台经验丰富的实验员操作完成。

  • 更新时间:2022-12-23
  • 浏览次数:541

详细介绍

裸鼠皮下成瘤实验技巧

1、细胞状态是成瘤实验的关键,所以细胞生长状态一定要好,取处于对数生长期的细胞,细胞达80-90%左右密度为宜;收集细胞前一天晚上更换新鲜培养基。
2、胰酶消化细胞后用预冷的PBS洗两遍,目的为去除细胞中的血清。
3、用PBS或者无血清培养基吹打细胞沉淀至合适的浓度,一般皮下瘤接种的细胞量为1-5×10^6个细胞/支,接种体积为0.1ml,因此细胞悬液的浓度为1-5×10^7个细胞/ml。
4、细胞消化后应尽快接种到裸鼠皮下,一般尽量在半小时内完成,途中将细胞悬液放在冰上降低细胞的代谢。
5、选择的裸鼠一般在5-8周龄,体重18-20g左右,种植部位选择血供丰富区域,如腋窝中后部、腹股沟中上部。
6、接种前用枪将细胞悬液充分的吹散,防止细胞成团而降低细胞成活率。
7、接种时,针头在皮下进针深一点,约1cm深,减少注射后细胞悬液从针眼溢出。
8、如何抓牢裸鼠?左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤,小拇指夹住裸鼠尾巴。

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