咨询热线

18017847121

当前位置:首页   >  产品中心  >  实验  >  动物模型  >  动物哮喘模型

动物哮喘模型

简要描述:动物哮喘模型:是达为科生物较为成熟的动物模型之一,由动物平台经验丰富的实验员操作完成。

  • 更新时间:2021-11-12
  • 浏览次数:176

详细介绍

BALB/c小鼠于第0天和第14天分别腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2 mg/mL)和DBP溶液(0.5 mg/kg),第21~23天连续3天以0.5%的OVA溶液雾化激发,每天于上午下午固定时间雾化2次,每次20min。雾化过程中观察小鼠一般行为变化,后一次雾化结束后24小时,小鼠摘眼球取血,取支气管肺泡灌洗液( Bronchial Alveolar Lavage, BALF )及肺组织。
一般行为学观察  观察小鼠在雾化过程中是否出现挠脸、毛发竖立、呼吸急促、烦躁不安、大小便失禁等现象。
血中Eos计数    后一次雾化激发结束24h后,小鼠摘眼球取血,获得血液后立即取出20 μl与380μl 嗜酸性粒细胞稀释液混匀,利用细胞计数板于光学 显微镜下进行Eos计数。
血清中IgE测定   将获得的血液静置2h后,离心,3500 rpm,15min,取血清,按IgE ELISA试剂盒说明书进行测定,并通过样本总蛋白含量进行结果校正。
BALF细胞分类计数  将小鼠仰卧位固定,打开胸腔后,结扎右肺及左侧肺上叶。分离并暴露气管,用适宜针头进行气管插管,以预冷PBS反复灌洗肺组织(0.5 mL/次,共两次),收集BALF,低温离心( 3500 rpm,10min ),取上清,保存于-20℃待测。细胞沉淀用0.2 mL预冷PBS重悬,吹打均匀后取10 μl于细胞计数板上在光学显微镜下计细胞总数,剩余细胞悬液涂片,用快速瑞姬氏染液染色,显微镜下进行细胞分类计数。
BALF中IL-4、IL-5、IL-9、IL-13、IFN-γ的测定  将获得的BALF上清根据相关细胞因子检测试剂盒的说明书进行各指标定量检测,测定结果经总蛋白含量校正。
肺组织中IL-4和IFN-γ的测定  将右侧肺组织用预冷的PBS研磨得15 % 组织匀浆,低温离心,3500 rpm,15min,取上清按照 ELISA 测定试剂盒的操作步骤进行IL-4和IFN-γ测定,并通过样本总蛋白定量来进行校正。
肺组织HE及PAS染色  剪取左肺上叶,置10%中性福尔马林中固定,石蜡包埋,常规石蜡包埋,切片,HE及PAS染色,镜下观察肺组织炎性细胞浸润及黏性蛋白增生情况。

产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
上海达为科生物科技有限公司
  • 联系人:张
  • 地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B637室
  • 邮箱:zhangyan@jrdbio.com
  • 传真:021-55130728
关注我们

欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息

扫一扫
关注我们
版权所有©2022上海达为科生物科技有限公司All Rights Reserved    备案号:沪ICP备15041491号-2    sitemap.xml    总流量:44083
管理登陆    技术支持:化工仪器网