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肿瘤细胞具有*的增殖能力,在一个适宜的环境中就能够实现细胞增殖分裂,裸鼠成瘤是常见的验证肿瘤细胞体内增殖的模型。由于大部分肿瘤研究使用到的是人类来源的细胞,种植到免疫正常的动物体内会发生免疫排斥反应,所以需要用免疫缺陷小鼠作为成瘤模型的动物。
一、实验动物
动物种属、品系:BALB/C裸鼠
动物性别:雄性
动物年龄:4-6周龄
二、造模方法
雄性裸鼠,接种肿瘤细胞密度1*10^6~1*10^7cell/ml,接种0.1~0.2ml,皮下(腋下或背部皮下)注射成瘤。将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中,放于冰盒中携至动物房,直接注射即可。制备周期:4-8周,根据肿瘤细胞种类调整。
三、注意事项
1 肿瘤细胞:何种肿瘤(用对数生长期的,活力高的);其次接种细胞的数量记数要准确。一般来说肿瘤细胞存活力还是比较高的,所以重点要考虑细胞数的问题,不要超过1*10^7;
2 接种方式:注意不要漏液,否则会损失细胞;
3 饲养环境:要求SPF条件;
4 时间方面:
1)接种时间,在1小时之内完成。但在实际操作过程中,裸鼠的数量可能较多,1小时之内做不完,故可以预先将细胞放在冰盒里暂为保存。 2)成瘤时间,每种肿瘤细胞情况不同,若细胞数合适,一般一周左右能成瘤;另外,如果是皮下注射,要注意是否打到深层组织,比如肌肉,那即使成瘤了,也不好观察。
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