详细介绍
IHC免疫组化染色技术服务介绍:
我们为您提供IHC免疫组化染色技术服务,免疫细胞化学ICC ,原位分子杂交ISH 等组织形态学方面的一站式技术服务,包括实验设计、实验操作、图片采集,实验结果分析等方面,也可以承接阶段性的技术服务。检测指标:肿瘤标志物、癌基因及抑癌基因蛋白、细胞周期蛋白、凋亡基因蛋白、细胞表面抗原等。 样本及来源:石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片或培养细胞;来源于人、小鼠、大鼠或其它组织的包埋与切片。
技术特点和优势
IHC技术的特点包括高特异性、能够在组织水平上定位蛋白质、适用于固定和新鲜组织样本等。它的优势在于能够提供关于蛋白质在细胞和组织中分布的详细信息,这对于理解生物学过程和疾病机制至关重要。
石蜡切片免疫组化:
①67℃烘箱烘片2小时,常规脱蜡至水,用pH 7.4的PBS冲洗三次,每次3 min;
②将切片置于沸腾的柠檬酸盐缓冲液中中档微波处理10 min,蒸馏水冲洗三次,PBS冲洗三次,每次3 min;
③3%H2O2室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性,PBS冲洗三次,每次3 min;
④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10 min,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗,37℃孵育1-2 h或者4℃孵育过夜;
⑤PBS冲洗三次,每次3 min;⑤滴加稀释至适当比例的带标记二抗,37℃孵育10~30 min,PBS冲洗三次,每次3 min;
⑥滴加适当比例稀释的辣根酶标记物工作液,37℃孵育10~30 min,PBS冲洗三次,每次3 min;
⑦显色剂显色,自来水充分冲洗,复染细胞核,酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
冰冻切片免疫组化:
①新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片,厚度为5~6 μm;
②载玻片可不打底,裱片后立刻用电吹风吹干;
③染色前需用冷丙.酮4℃固定10~20 min;
④PBS洗2次,每次5 min;
⑤3%H2O2灭活内源性过氧化物酶20 min,需避光处理;
⑥后续血清封闭与抗体孵育步骤与石蜡切片相似,最后脱水透明封片进行观察。
根据最新的信息,我们可能会提供最新的抗体和检测系统,以及优化的染色方案,以适应不同的研究需求和提高实验结果的质量。
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