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脑缺血再灌注动物模型

简要描述:上海达为科致力于临床前药效学CRO实验,多年的脑缺血再灌注模型的构建,为广大药效学实验提供保障。可开展脑缺血再灌注模型的构建。

  • 更新时间:2022-12-28
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详细介绍

局灶性脑缺血/再灌注损伤模型造模方案:

禁食12h(不禁水)左右的SD大鼠麻醉后取仰卧位,去除颈前被毛、常规消毒后,颈部正中切口,仔细分离左侧的颈总动脉(CCA),避免损伤迷走神经及颈交感干,并向上分离出颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。在距离CCA分叉较远处用医用缝合线结扎CCA和ECA,将CCA和ICA拉成一直线,用*脉夹暂时阻断ICA血流,在CCA血管壁上剪一小口,把粗细适中的线栓自CCA切口插入,沿着CCA分叉处缓慢插入ICA,遇有轻微阻力即停止,此时线栓的膨大顶端即堵塞大脑中动脉的开口,在用缝合线固定住线栓,常规消毒后全层缝合皮肤切口。假手术组动物手术步骤类似,但未作线栓闭塞中动脉。造模后的大鼠轻轻的转移到鼠笼里,平躺在适温垫料上以保持大鼠正常体温。

栓塞2h后缓慢拔出一部分线栓,使线栓顶端不再闭塞中动脉,让缺血侧脑部血液再灌注。再灌注1h后对大鼠进行神经功能评分,屏风方法按照Longa法神经行为缺损评分标准:没有神经损伤计为0分;不能伸出左前爪(轻微神经损伤)记为1分;向左绕圈(中度神经损伤)记为2分;向左边倾斜(重度神经损伤)记为3分;不能自主行走或失去知觉记为4分。神经功能缺损评分在2~3分视为模型成功。


分子实验平台:高效运作了qRT-PCR、Western blot、双向电泳技术、分子克隆与质粒构建、流式细胞仪检测、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝胶电泳迁移实验、酶联免疫吸附测定、外泌体抽提及鉴定等实验。


基因组学平台:可以完成甲基化检测、基因芯片分析、高通量测序等实验。


蛋白组学平台:能实现LC-MS、ITRAQ、蛋白质修饰分析等重点实验项目。


病理学平台:涉及免疫荧光染色、免疫组织化学染色、HE染色、特殊染色等实验。


临床前CRO服务:主要提供呼吸系统、神经系统、免疫系统性疾病的药效学评价服务,包括靶点验证、体内外模型的构建、药物筛选、药物分析、药效性评价、药代动力学和药理学研究以及院内制剂研发等。


项目转化服务:助力客户进行方案设计、联合课题申报、药物项目引进和孵化,解决客户对实验技术平台、专业人和融资的需求;


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