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骨缺损模型
目前常用于制作骨缺损模型的动物有小鼠,大鼠,兔,犬,猪,羊等。
骨缺损动物模型理论上是选择越大型的动物越好,比如犬,猪,羊等。
一则越大型的动物骨折愈合机制与人类越相似;再则越大型的动物制作过程中越易于操作。大型动物也有实验成本过高,样本数量难以保证的现实缺点。
小鼠模型价格低廉,来源广泛,小鼠自身具有较强的抗感染及耐受手术的能力,且围手术期易于管理,因此小鼠模型具有一定优势。
一般小鼠选择2到3个月的小鼠作为模型,雌兔选择6到10个月的兔作为模型。
骨缺损模型构建骨缺损部位选择
骨缺损的部位可以划分为负重部位骨缺损与不负重部位骨缺损两类。
机械性骨损伤
机械性骨缺损可用于模拟创伤或手术导致部分骨受损或缺失的情况。
1.颅骨缺损模型
颅骨是研究原位骨愈合常用的手术部位之一,动物选小型啮齿类动物,如小鼠、大鼠。
造模举例:
通常选取成年雄性大鼠,盐suan氯an酮(40mg/kg)与盐酸甲苯噻嗪(8mg/kg)联合麻醉,也有采用10%水he氯醛(4ml/kg)腹腔注射麻醉。大鼠头颅备皮、消毒铺巾后,从鼻骨开始,沿颅骨矢状线取纵行手术切口,长约1.5~3cm,逐层分离软组织,充分显露矢状缝、双侧顶骨及部分额骨和枕骨。
根据圆形缺损直径大小的不同,在不同部位进行钻孔建模,直径≤6mm一般在双侧顶骨处钻孔;直径>6mm一般以矢状缝为中心进行钻孔。钻孔前需将骨膜充分剥离,将不同直径的空心钻头连接电钻后,低速(≤1500rpm)钻取,钻取过程中助手用生理盐水滴注(1滴/2s)降温。钻取时动作需轻柔(单纯凭借电钻的自然重力,尽量不附加外力),避免将骨组织全钻穿,接近钻穿时用剥离器沿着圆形缺损周边进行钝性分离,从而避免硬脑膜及其下方的血管、脑组织的损伤。生理盐水冲洗术野,探查无活动性出血后,用0号线逐层关闭皮下组织、皮肤切口。术后大鼠侧卧于30℃恒温台进行麻醉复苏,全清醒后送回饲养笼继续喂养,于术后8~12h,20~24h,32~36h分别予以丁丙nuo啡(0.05mg/kg)腹腔注射镇痛。
大鼠的种系一般选择SpragueDawley(SD)大鼠和Wistar大鼠,这两个品种的大鼠生长较快、繁殖能力强,容易饲养,对传染病的抵抗力较强。
通常采用成年的雄性大鼠进行动物实验,SD大鼠一般>12周(体重300~350g)。
大鼠颅骨中常用的临界骨缺损直径为5~8mm。一般认为,这种5mm骨缺损的优点是每只动物能诱发两个缺陷,避免跨越矢状缝。
颅骨缺损模型在研究中应用广泛,是可用组织学和放射学分析的标准化骨缺损,可用于评估骨组织工程生物材料之间的差异,缺点是无法评估生物材料在生理力学载荷下的性能。
2.大鼠股骨髁临界性骨缺损模型:
.选择8周龄雄性SD大鼠作为实验对象,体重范围为250-300克。
.使用1%wubabituona进行麻醉,并通过膝关节内侧作一1 cm纵行切口,逐层分离组织以暴露股骨内侧髁。
.在内侧髁几何中心处使用高速电钻垂直于骨面制造骨缺损,直径可根据研究需求设定在2-4 mm之间,深度通常为4 mm。
.术后进行抗生素处理以防感染,并对骨缺损愈合情况进行观察和评估。
3.胫骨大段骨缺损模型:
.使用10周龄SD雄性大鼠,通过waikeshoushu在右胫骨中部制造4 mm的骨缺损。
.固定装置可以采用定制的六孔不锈钢板、1 mm直径的Kirschner针或圆形外部固定器。
.记录建模时间、出血量和肢体肿胀持续时间,以评估不同固定方式的效果。
4.小鼠骨缺损模型构建:
.构建可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型,具体方法可能涉及在小鼠骨骼中制造标准化的骨缺损,并植入再生支架材料。
在构建骨缺损模型时,应严格遵守实验室安全规程和动物福利标准。模型的成功构建通常需要通过X射线、CT扫描或肉眼观察来确认骨缺损的大小和形状,以及固定装置的稳定性。此外,应记录所有手术过程中的关键参数,如出血量、手术时间和术后并发症,以确保模型的重复性和可比性。
请注意,上述信息是基于最新的搜索结果,确保了时效性和相关性。在进行实验之前,建议详细阅读相关的实验协议和最新的科学文献。
参考
[1]陈仁杰与于腾波, 大鼠股骨髁临界性骨缺损模型制备及临界值. 临床医学进展, 2023. 13(4): 第5666-5671页.
[2]王飞燕等, 可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型的构建研究. 中国实验动物学报, 2023. 31(08): 第985-992页.
[3]申震等, 基于Masquelet诱导膜技术比较不同固定方式构建的胫骨大段骨缺损模型. 中国实验动物学报, 2018. 26(06): 第673-680页.
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