多囊卵巢模型构建

多囊卵巢模型构建方法

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种复杂的内分泌疾病，影响女性的生殖健康和代谢。为了研究PCOS的发病机制和潜在治疗方法，科学家们开发了多种动物模型。

以下是大鼠多囊卵巢模型构建的常用方法：

  1.药物诱导法：使用外源性雄激素，如脱氢表雄酮（DHEA）或liusuanpulagaotongna，通过皮下注射的方式给予动物。例如，可以从21日龄开始，每天注射一定          剂量的liusuanpulagaotongna，连续注射20天，以建立PCOS模型。

  1.遗传修饰法：利用基因工程技术创建携带PCOS相关基因突变的动物模型。

  1.饮食诱导法：通过高脂饮食或高糖高脂饮食诱导动物模型，模拟PCOS患者的代谢异常。有时，药物诱导和饮食诱导会结合使用，以增强模型的PCOS特征。

例： 21日龄未成年雌性SD大鼠，注射用liusuanpulagaotongna，注射用水，血清睾酮（T）、雌二醇（E₂）、huangtitong（P）、催乳素（PRL）检测试剂盒。

模型鼠于21日龄断乳，喂以颗粒饲料，自由饮水，适应性喂养2天。第23 日开始每日皮下注射liusuanpulagaotongna9mg/100g(相当于DHEA6mg/100g)+0.4ml注射用水，连续20天，以建立PCOS大鼠模型。大鼠于注药后21日晨用6%shuihelvquan麻醉，摘取双侧卵巢，在解剖显微镜下去除卵巢表面脂肪组织，称重，分别用4%多聚甲醛固定作光镜HE 染色及2.5%戊二醛固定作透视电镜检查。于注药后21日晨取大鼠下腔静脉血，3000r/min，离心3分钟，收集血清，-20℃保存。采用化学免疫发光法检测血清中T、E₂、P、PRL含量。

【模型特点】

1.卵巢体积偏大，表面苍白，可见较多囊性扩张的卵泡，重量明显高于正常卵巢。

2.光镜HE 染色观察，卵巢切面沿包膜下见较多大小基本一致的囊性扩张的卵泡，卵泡内卵母细胞或放射冠消失，颗粒细胞排列松散，颗粒细胞层变薄至2~3层甚至消失，卵泡膜细胞增生，较少有黄体形成。

3.透视电镜观察，卵巢颗粒细胞层数减少，细胞器数量及细胞内脂滴减少，颗粒细胞形态变形，呈梭形变，细胞核核形不整，核内染色质浓集。细胞间纤维增生，线粒体肿胀，线粒体嵴断裂甚至消失。卵泡膜细胞层数增多，细胞内可见到脂滴。

4.血清T浓度非常显著性增高，血清E₂浓度显著性增高。

参考：

[1]廖宝莹等, 多囊卵巢综合征的啮齿类动物模型. 中华生殖与避孕杂志, 2021. 41(10): 第8页.

[2]彭洋洋, 张怡与谢青贞, 脱氢表雄酮联合高脂饮食诱导建立小鼠多囊卵巢综合征模型的研究. 生殖医学杂志, 2021. 30(12): 第1627-1633页.