详细介绍
Edu染色是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料 的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解 、热解 、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在体外细胞和体内组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。
Edu染色注意事项
1 、铺板
细胞数量:在前期细胞培养中,观察细胞贴壁率、贴壁后面积大小、倍
增时间;以确保处理过程中不会细胞过满(铺板太密或长太久,细胞都会挤死掉的!),准确呈现处理因素与细胞数的关系(5×103 ~10×103 )。意思就是先了解下你需要检测的细胞,做个预实验先。
2、避免血清的干扰
用含胎牛血清培养基培养细胞时,高浓度血清物质(我也会吸光哒!)会影响试验孔的吸光度值,降低实验敏感度。
3、防止边缘效应及复孔设置
应在96孔板边缘滴加PBS(别省那点板子啊!),边缘孔的水分挥发较快,药物易被浓缩,对实验影响很大大。复孔,做3-5个,推荐5个
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