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油红O染色(脂肪)

简要描述:油红O染色(脂肪)油红O脂肪染色法通常应用于检测组织或细胞内的脂肪情况,油性红O(Oil Red O)是一种脂溶性染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,在脂肪内能高度溶解,其染色原理是油红O能特异性地与组织和细胞内的中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白产生吸附作用从而使脂肪染色。

  • 更新时间:2024-04-12
  • 浏览次数:108

详细介绍

油红O染色(脂肪)实验操作方法

(1)冰冻切片厚度 6~10µm,不固定或 10%福尔马林固定 10min后水洗

(2)切片加入60%的异丙醇内浸洗 2min

(3)用冰蒸馏水稍微清洗一遍(说明书没说明要洗)

(4)切片加入改良油红 O 染色液中,密闭染色 10~15min,该过程注意避光

(5)用冰蒸馏水清洗一遍(说明书没说明要洗)

(6)加入 60%的异丙醇内稍洗以去除染液(大约几秒)

(7)加入冰蒸馏水中稍微清洗一遍

(8)Mayer 苏mu素染色液复染核 5min

(9)用冰蒸馏水清洗一遍

(10)片子用滤纸吸干水分

(11)用甘油明胶或阿拉伯糖胶封片。

油红O染色注意事项:

1. 石蜡切片不能用于油红O染色,原因在于石蜡包埋过程中需要脱水,脱水过程中需要乙醇-二甲苯和石蜡,二甲苯是有机溶剂,会把中性脂肪溶解;

2. 冰冻切片准备时,包埋的降温过程建议选择干冰,原因在于若选择液氮降温过程较强烈,可能导致组织内部炸裂,而干冰降温的过程比较缓和,染出来的片子比较好看;

3. 切片的厚度要稍微厚一些,建议选择8-10μm;

4. 实验设计建议设计阴性对照和阳性对照,如阳性对照可以用脂质丰富的肝脏组织等,阴性对照可以根据文献来选择无脂肪沉积的组织。



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