人胃癌高转移模型的建立可以：（1）研究肿瘤转移机制；（2）研究肿瘤防治；（3）为肿瘤转移研究提供更为理想的动物模型。肿瘤组织块原位移植法实验方法原理用人胃癌组织块SGC-7901原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴结和肝脏等器官转移，转移率达66.7%(2/3)，第6周末转移率高达*(10/10)。实验材料雄性SPF级SCID小鼠人胃癌组织SGC-7901试剂、试剂盒水合氯醛福尔马林液仪器、耗材饲养笼光学显微镜石蜡实验步骤一、实验材料准备1.雄性SPF级SCID小鼠，...

人胰腺癌裸小鼠模型实验方法原理将人胰腺癌细胞株8988接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养，HE染色。实验材料裸小鼠BALBcnu-nu胰腺癌细胞株8988试剂、试剂盒RPMI-1640*培养基胰酶戊二醛仪器、耗材CO2培养箱试管实验步骤一、实验材料准备裸小鼠BALB/cnu-nu，4～6周龄，体重16～20g，雌雄兼备，SPF级环境中饲养，恒温25～27℃，恒湿45...

试剂、试剂盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物仪器、耗材热循环仪实验步骤一、材料1.酶和酶缓冲液Taq聚合酶许多Taq聚合酶都可以用；作者发现Roche公司的Taq聚合酶可以满足大多数需要.如果需要提高PCR产物的特异性，应该使用热启动聚合酶。使用Tag聚合酶本身附带的缓冲液。2.核酸和寡核苷酸（1）溶于水的DNA如果DNA在TE中，应该在PCR反应混合物中添加MgCl2.如果用从石蜡包埋的组织中纯化的DNA做模板，选择的STR标记的大小应该是78~250bp,因为这些DNA模板...

免疫荧光方法中的重要环节:1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。3、血清封闭：为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合，需要在一抗孵育前先用血清（与二抗来源一致）封闭，减弱背景着色。血清封闭的时间是可以调整的，一般10-30min。4、一抗孵育条件：在免疫组化反...

免疫荧光标记技术（immunofluorescencetechnique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。实验材料组织样品试剂、试剂盒PBS抗体仪器、耗材玻片加湿盒实验步骤1.将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。2.待载玻片达室湿且未干...

一.细胞复苏与培养将液氮或-80℃保存的肿瘤细胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液，于1500转/分，离心3分钟。弃上清，再吸取8.0ml培养基质混匀细胞沉淀，再1500转/分，离心3分钟，弃上清，细胞沉淀用1.0ml培养基混匀，备用。另取一个75cm2方瓶，加入14.0ml培养基质，将上述制备的含肿瘤细胞悬液(1.0ml)加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培养。若此肿瘤细胞悬浮生长，大约3－4天细胞基质会变黄，5.0ml细胞悬液可传代...

免疫荧光标记技术（immunofluorescencetechnique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒多聚-L-赖氨酸仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.细胞在冰浴中冷却，然后用台式离心机于4℃以800g离心5min，吸去培养液并以4℃PBS重悬细胞。2.离心吸去PBS，以1~2ml2%PFA固定液，...