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PCR引物合成实验

简要描述:PCR引物合成实验:引物合成是通过测定引物的OD值,溶解引物,终合成引物的一个完善的过程。

  • 更新时间:2021-11-12
  • 浏览次数:295

详细介绍

目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA的片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。

引物合成特点:
1.引物合成的纯度高。
2.合成的序列长。
3.合成的效果好。

引物OD数的定量:
用紫外分光光度计,波长260nm,石英比色杯,光程为1厘米,测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度稀释到0.2-1.0之间。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,用1ml水稀释测OD值。需要根据稀释倍数换算出母液的OD值

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