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卵巢早衰模型

简要描述:卵巢早衰模型:POF病因多种多样,具体发病机制尚不清楚,为了寻找病因和有效的治疗方法,就必须建立与人类临床表现和发病机制相似的动物模型。国内外专家学者根据POF的病因的多样性建立了不同的动物模型。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍

1、材料与方法

1.1 实验材料
雌性Wistar大鼠。

1.2 实验动物分组
本实验选用雌性Wistar大鼠40只,体重260~300 g,随机分成2组。正常对照组:20只。实验模型组:20只。

1.3 实验方法
1.3.1 POF大鼠模型制备 实验模型组雌性Wistar大鼠用雷公藤多甙片(10 mg/片),0.6 mg/(100 g•d)体重,灌胃1次/d,连续9d,建立POF动物模型。
1.3.2 组化标本制备
对实验动物腹腔麻醉后开胸,经左心室70滴/min滴入1%肝素钠的生理盐水500ml,同时剪开右心耳。继用0.1m磷酸盐缓冲液(PBS,PH=7.4)配制的固定液(含4%多聚甲醛)灌流固定。取出实验动物的卵巢组织,放入含4%多聚甲醛PBS的固定液中进行后固定大约2h,之后将实验动物的卵巢组织切成薄片移入含20%蔗糖的PBS中。在4℃冰箱中存放,至组织薄片沉底,经水包埋,恒冷箱连续横切片,片厚20μm。经OCT包埋,恒冷箱连续切片,片厚16 μm,-70℃保存备用。
1.3.3 尼氏染色
冷冻切片吹干,经PBS漂洗5min3次,将切片置入1%甲苯胺蓝溶液中37℃孵育90min,取出后用蒸馏水冲洗,PBS漂洗5min3次,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,光湿微镜下观察。
 

2、结果

尼氏染色结果:
正常对照组大鼠卵巢的尼氏染色切片上,卵泡数目正常,卵泡无闭锁,间质无明显增生。
实验模型组大鼠卵巢可见卵巢萎缩,卵泡数目减少,卵泡闭锁增多,间质增生明显。
根据尼氏染色结果证明POF动物模型制备成功。

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