实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR实验服务介绍：

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法，而且也是一个能对核酸分子进行定量的有力工具。1996年，美国Applied Biosystems公司推出了一种新定量试验技术间实时荧光定量PCR它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针对PCR产物进行标记跟踪；实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时，探针结合在DNA任意一条单链上；PCR扩增时，Taq酶的5'端一3'端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。

实时荧光定量PCR样品准备条件:

细胞样品：收集细胞后放入液氮中速冻保存或速东24h后转入-80°C冰箱保存；收集细胞后，视细胞量，直接加入1-1.5mL Trizol溶解裂解细胞，再转入-80°C冰箱保存。

组织样品：动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存，液氮冻存24h后可转入-80°C冰箱保存；组织样品同样可以采用Trizol溶解裂解后放入-80°C冰箱保存。特殊组织(植物等)建议采用新鲜组织即刻提取RNA,逆转合成cDNA后-20°C保存备用。所有样品的处理和保存过程中，切总反复冻融。

样品运输条件：

样品运输条件根据实验样品的处理条件，可以选择液氮或者干冰运输。

科研实验服务:

1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析

2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq

3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA

6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选

7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR