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HOECHST染色实验

简要描述:HOECHST染色实验Hoechst 33342 Staining Dye Solution 是一种用于在荧光显微镜下标记 DNA 的荧光染料。 该产品可用于荧光显微镜、微孔板、比色皿和流式细胞仪应用。 它还可用于通过绘制标准排放-含量曲线来检测样本 DNA 的含量。

  • 更新时间:2024-03-28
  • 浏览次数:199

详细介绍

HOECHST染色实验步骤

1. 将荧光染料(Hoechst 33342、AO、PI 或 EB)以合适浓度直接添加到细胞培养基中。

2. 将细胞孵育 5 分钟。

3. 在倒置荧光显微镜下直接观察细胞。

如果需要,在对转染细胞进行重要染色后修复细胞,以进一步详细分析形态:

1.用PBS清洗细胞(此步骤可省略),然后用4%(w/v)多聚jia醛或1%(v/v)戊er醛室温固定细胞5分钟。

2. 用 PBS 清洗细胞。

3. 将样品用 PermaFluor 水性封固剂封固,并在配备适当滤光片的荧光显微镜下检查细胞。

洗涤应尽可能轻柔,以尽量减少死细胞的损失。

HOECHST染色实验 激发/发射光谱

当与 dsDNA 结合时,Hoechst 33342 在紫外范围 (350 nm) 内具有最大激发波长,并且染料可以在最大发射波长 461 nm 的蓝色通道中被最佳检测(图 2)。 Hoechst 33342 在激发和发射波长之间具有特征性的宽斯托克斯位移,当需要良好的光谱分离以减少荧光干扰时,例如在免疫荧光显微镜的染色质复染中,这种染料是最jia选择。


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