烫伤感染动物模型

一、烫伤感染模型的定义与分类

1. 定义

烫伤感染模型是一种复合型动物模型，通过人为制造烫伤创面并接种病原菌，模拟临床烫伤后创面感染的病理过程。其核心目标是研究感染机制、评估抗感染药物及创面愈合策略。

• 烫伤基础定义：由无火焰高温液体（沸水、热油）、固体（热金属）或蒸汽导致的组织损伤，破坏皮肤屏障功能，增加病原体定植风险。

2. 分类依据

根据感染发生方式分为两类：

• 自发感染模型：烫伤后不主动接种病原菌，依赖环境微生物自然定植，模拟临床继发感染。

• 外源性感染模型：烫伤后立即接种特定病原菌（如金黄色pu萄球菌、铜绿假单胞菌），可控性强，用于机制研究。

烫伤深度分级（基于组织损伤程度）：

二、动物模型选择与构建方法

1. 常用实验动物及特点

2. 模型构建的核心步骤

（1）烫伤创面制备

• 方法选择：

• 热水烫伤法：动物脱毛麻醉后，背部浸入恒温水浴（温度/时间因动物而异）：

• 大鼠：92℃水浸18秒 → Ⅲ度烫伤；100℃砝码压5秒 → 浅Ⅱ度。

• 小鼠：80℃水浸20秒 → Ⅲ度；55℃水浸20秒 → Ⅱ度。

• 热金属接触法：铜块/电烙铁预加热至80–100℃，垂直按压皮肤（时间控制深度）。

• 深度验证：48小时后组织学检查（HE染色），确认真皮坏死程度。

（2）病原菌接种

• 菌种选择：临床常见病原体如金黄色pu萄球菌（ATCC 25923）、铜绿假单胞菌。

• 接种方法：

• 刮擦法：创面轻微刮擦后滴注菌液（20μl，浓度1×10⁶–1×10⁸ CFU/mL）。

• 直接涂布：均匀涂布菌液于创面（大鼠：1ml菌液）。

• 优化浓度：小鼠模型验证显示1×10⁸ CFU/mL为最佳感染浓度（显著延迟愈合，P<0.01）。

（3）感染维持与监控

• 单笼饲养避免交叉感染，自由饮水饮食。

• 定期检测痂下细菌载量（>1×10⁵ CFU/g组织提示感染成立）。

三、模型评估指标

1. 感染特异性指标

• 细菌载量：

• 痂下组织定量培养（CFU/g）。

• 内脏（肝、肾、肺）细菌定植评估全身播散。

• 炎症反应：

• 局部：HE染色观察中性粒细胞/单核细胞浸润；ELISA检测创面促炎因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）↑ 和抗炎因子（IL-10）↓。

• 全身：血清HMGB-1（损伤相关分子）、透明质酸↑，纤维连接蛋白↓。

2. 创面愈合指标

• 愈合时间：感染组愈合时间显著延长（小鼠：15.92±0.34天 → 21±0.95天）。

• 组织病理学：

• 光镜观察上皮再生、胶原排列、肉芽形成。

• IHC染色检测凋亡标志物（如cC3上调）。

3. 全身并发症指标

• 死亡率：感染组5天存活率降至40%（对照组100%）。

• 血常规：白细胞总数↑（尤其粒细胞/单核细胞）。