小鼠流感模型构建

简要描述：小鼠流感模型构建是一种重要的实验研究工具，用于模拟人类流感病毒感染过程。通过将流感病毒接种到小体内鼠，可以观察到小鼠出现类似人类流感的临床症状，如发热、体重下降、呼吸困难等。

更新时间：2025-07-09
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详细介绍

一、模型建立核心要素

（一）病毒毒株与适应株

常用毒株：

H1N1 PR8（A/Puerto Rico/8/34）：标准实验室株，致病性稳定，广泛用于基础研究。
H9N2（A/swine/Jiangsu/C1/08）与 H1N1 SD731（A/swine/Shandong/731/2009）：用于模拟亚型特异性感染。
新甲型H1N1：需通过鼠肺传代获得适应株（如SC/09），提高小鼠致死率。

病毒制备：

扩增：病毒接种9-11日龄SPF鸡胚，收获尿囊液分装保存（-80℃）。
滴度：感染剂量通常为 1×10⁶ TCID₅₀/50μL 或 250 PFU（鼻内接种）.

（二）感染途径与方法

感染方式	操作要点	适用场景
鼻内接种	麻醉小鼠后滴鼻接种病毒悬液（50μL）	操作简单，模拟上呼吸道感染
气雾攻击	雾化H1N1 FM1/PR8病毒，小鼠吸入感染	更接近自然感染，但需专用设备
颅内注射	注射病毒至耳根与眼角连线处（0.03mL, TCID₅₀=10⁻³）	神经系统感染研究（如脑炎）
双重感染模型	先接种流感病毒（H3N2），3天后感染HSV-1，检测细胞因子与免疫细胞变化	研究病毒共感染机制

关键参数：
麻醉推荐异氟醚（安全可控）或干冰（快速）。
气雾感染需控制雾化颗粒直径（1-5μm）以深入肺泡。

（三）动物品系选择

品系	病毒敏感性	病理特征
BALB/c	中高度敏感，H1N1感染后肺损伤显著	炎症因子（IL-6、TNF-α）升高明显
C57BL/6	对H3N2抵抗较强，H1N1易感性中等	适合免疫机制研究（T细胞应答）
DBA/2J	高敏感性（尤其H1N1），体重减轻显著、死亡率高	强细胞因子风暴，肺病理损伤更重
ICR	广谱易感，气雾感染后肺指数升高快	适合急性感染病理观察

注：
雌性BALB/c小鼠更常用（体重15-20g，SPF级）。
DBA/2J品系可增强发病症状，但需注意高死亡率风险。

二、疾病进程与评估指标

（一）临床监测

生存指标：

体重下降：感染后3天开始下降，>20%需人道终点处理。
存活率：重度模型（如PR8）感染后7天死亡率可达80%。

行为评分：

活动减少、扎堆蜷缩、呼吸急促、毛发脱落。

体温变化：

非发热模型：核心体温下降（与人类发热相反）。
湿热证模型：高脂饲料+热应激后肛温升高（表1）：

组别	肛温（℃）
正常组	36.8±0.3
病毒组	35.2±0.4a
模型组	37.5±0.6ab

（二）器官损伤评估

肺指数（核心指标）：

公式：肺指数 = 肺湿重（g）/ 体重（g） × 100。
阳性标准：感染组肺指数显著高于对照组（P<0.05）。

肺病理分级：

+：炎细胞浸润，毛细血管充血；
++：肺泡渗出物增多，部分实变；
+++：肺组织大面积实变。

多器官指标：

肝损伤：ALT/AST升高。
肾损伤：血肌酐（Cre）≥2倍基础值。

（三）分子与免疫检测

检测类别	指标	技术方法
病毒载量	肺匀浆病毒滴度、RT-qPCR检测病毒RNA	细胞病变效应（CPE）、空斑试验
炎症因子	IL-6、TNF-α、IFN-γ	ELISA（血清/肺泡灌洗液）
免疫细胞变化	NK细胞、T细胞亚群（CD4⁺/CD8⁺）、树突状细胞	流式细胞术
血氧与组织缺氧	血氧饱和度（SpO₂）	MouseOx Plus脉搏xue氧仪

动态监测：
炎症峰值：感染后12-24h（IL-6、TNF-α）。
器官衰竭期：24-48h（肺实变、血氧骤降）

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小鼠流感模型构建

一、模型建立核心要素

（一）病毒毒株与适应株

（二）感染途径与方法

（三）动物品系选择

二、疾病进程与评估指标

（一）临床监测

（二）器官损伤评估

（三）分子与免疫检测

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