【实验目的】1.学习大鼠胃溃疡(gastriculcer)模型建立的方法。2．观察药物对实验性胃溃疡的防治作用。3．了解组织切片和HE染色方法。【实验原理】消化性溃疡(pepticulcer)是由多种因素引起的一种常见病。正常情况下，机体有胃黏液、胃黏膜屏障（mucosalbarrier）、黏膜细胞更新以及胃、十二指肠节律性运动功能等一系列保护性机理，使胃、肠黏膜不受损伤。但过度的精神紧张、情绪激动，会使神经系统和内分泌功能紊乱；饮食失调，如粗糙食物，骨刺等对黏膜的物理性损害...

实验材料细胞样品试剂、试剂盒RNA提取试剂盒荧光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆转录酶MMLV异丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2琼脂糖溴化乙锭MOPS甲醛乙酸钠EDTAEB溴酚兰仪器、耗材离心管离心机风光光度计电泳槽凝胶板RealtimePCR仪一、样品RNA的抽提1.取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。2.两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃...

ELISA实验因灵敏度高，特异性强在生物科研上得到了广泛的认可，但对初学者而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会对最终的实验结果产生比较大的影响，比如实验出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行一一解析。1.白板现象在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现。出现该现象的可能原因：试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检测A，检测B或者底物溶液TMB。洗板或者加样过程中，酶标记物被污...

吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示更清晰，而胞质和中性颗粒则着色较差。基本方案实验材料原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液磷酸钠缓冲液乙醇二甲苯仪器、耗材染色盘培养箱滤纸实验步骤1.将显影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盘中。（1）1个盘：pH6.810mmol/l磷酸钠缓冲液，所配的25倍稀释的吉姆萨染液。（2）3个盘：水。（3）脱水系列溶液：①3个盘：分别盛50%、70%和95%乙醇。②2个盘：盛有...

蛋白提取组织样本总蛋白提取（小鼠肝组织）1、颈椎脱臼处死小鼠，75%乙醇擦拭皮肤，剪开腹腔，剪切肝脏组织。2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。3、称取0.6g左右肝组织，在平皿中剪碎组织，并转移到匀浆器。4、预冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）。5、取2ml预冷裂解缓冲液，迅速加入匀浆器，冰浴条件下充分研磨。6、组织研磨液转移至1.5ml离心管。7、4℃，15000rpm，离心10min。8、取上清组织蛋白粗提取液至新的1.5ml离心管。9、进行蛋白定量，-80...

1.对于贴壁细胞或细胞涂片PBS洗涤一次。2.如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。3.用4%多聚甲醛固定细胞15分钟，用PBS洗涤一次。4.将切片移入湿盒中加入新鲜配制的3%双氧水,以去除内源性过氧化物酶封闭液，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗；5.滴加正常山羊血清封闭液，室温30分钟，甩去多余液体；6.滴加一抗工作液，37℃孵育2h（或4℃过夜），然后PBS充分淋洗；7.滴加兔/鼠二抗工作液，室温孵育1h，PBS充分淋洗；8.DAB显色5-10分钟，在显微镜下掌握...

一般使用辣根过氧化物酶HRP-ECL发光法或碱性磷酸酶AP-NBT/BICP显色法。1．HRP-ECL发光法：将A、B发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于A、B混合液滴上，熄灯至可见淡绿色荧光条带（5min左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即*浸入显影液中1～2min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片*定影，清水冲净晾干，标定Marker，进行分析与扫描。2．AP-NBT/B...