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TTC染色

简要描述:TTC染色原理:TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。

  • 更新时间:2021-11-12
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详细介绍

一、TTC染色原理:TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。

二、新鲜组织切片制备及染色实验步骤:
1、取材:动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏) ,不经固定液固定,将组织直接放入-200速冻20-30min,如果不急用,可以暂时放置-80°C冻存。
2、组织块切片:将冻好的组织稍解冻,用莱卡刀片手动切片,厚度2-3mm为宜,切面整齐。
3、TTC染色:将切片放入提前预热好的的TTC孵育液中,放入37C水浴锅中避光孵育15-30min,间隔5-8min轻轻摇动组织,使其均匀接触到染色液,并观察染色结果。
4、拍照:组织成色后,加入固定液终止反应,并避光保存组织, 照相机拍照。

三、TTC染色判读:
组织正常区呈红色,梗死区呈苍白色。

四、注意事项:
1、标本越新鲜越好,勿固定,刀片宜薄而锋利, 在冰箱中速东的时间以能顺利切片为宜,保持切片平整。
2、染色后的标本浸存于国定液中避光保存,染色结果能保存数月 ,在阳光下易褪色;
3、TTC染色波避光4°C可保存一个月,使用前先复常温。

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