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PDX模型

简要描述:PDX模型:用于肿瘤研究的动物模型主要包括人源异种移植模型(PDX)、细胞系移植瘤模型(CDX)和遗传工程小鼠模型(GEMM)。

  • 更新时间:2024-02-28
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详细介绍

PDX模型构建方法


首先肿瘤组织标本应在含有胎牛血清(FBS)、青霉su/链霉su的冷溶液中制备,以提高移植的成功率。PDX所用的肿瘤组织有两种形式,病人肿瘤组织切成的2-3mm3碎片或者单细胞悬液。肿瘤标本在移植前用上述溶液洗涤三次。在4-8周龄免疫缺陷小鼠的下背部创建小切口用于皮下移植,并将肿瘤组织样本移植到手术区域。当肿瘤大小达到1-2cm3时意味着移植成功,平均需要2-4个月,如果在6个月内没有发现肿瘤,移植就没有成功。移植瘤长到足够大时可以再解剖重新移植到其他小鼠,第一代为F1,第二、三代为F2、F3。第三代(F3)及以上小鼠可用于药物治疗研究。



 构建PDX模型的步骤

位置选择

PDX移植效率因肿瘤类型、植入部位、肿瘤侵袭性和受体小鼠类型而异,肿瘤组织可以移植到肾包膜下、皮下、原位。一般来说,皮下和原位部位都是常用的。皮下移植:皮下移植是目前常用的移植手段,这种模型提供了肿瘤细胞的异质性,很少发生转移,而且较好地模拟了最初的肿瘤微环境。肿瘤植于皮下,易于观察和测量肿瘤的生长情况,操作相对简单,技术难度不高。对于消化系统肿瘤,如结肠癌、胃癌和食管癌等,皮下移植往往有较高的成功率。肾包膜下移植:肾包膜下具有丰富的血管结构,能够提供充足的营养、激素和氧气促进早期肿瘤组织生长,并保留原发肿瘤的异质性和遗传特征,可以极大地提高肿瘤移植的成功率。但是缺点是对实验人员有很高要求,需要丰富的外科手su经验。此外,肿瘤的大小不易观察和测量。原位移植:原位异体移植PDX模型(PDOX)可以产生转移,准确模拟原发肿瘤的自然环境,通常用于转移瘤的研究。

小鼠选择

PDX模型的受体是具有免疫缺陷的小鼠,目前常见的可用于PDX模型的小鼠品系有四种,其各自特点如下:裸鼠:裸鼠(nude mice)无胸腺,缺乏成熟的T细胞,B淋巴细胞功能较低,免疫球蛋白G含量低下,因此具有较低的免疫力,移植排斥少。SCID小鼠:SCID小鼠是由于第16号染色体上的隐性基因发生突变而产生的。



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