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转基因模型构建

简要描述:转基因模型构建:条件性敲除小鼠的应用对探究基因或蛋白在体内作用及分子机制有着重要意义

  • 更新时间:2024-09-18
  • 浏览次数:557

详细介绍

转基因模型构建的基本概念和目的

转基因模型构建是指将外源基因导入到动物基因组中,以创造出具有特定遗传改变的动物模型。这些模型在生物医学研究中非常有价值,因为它们可以用来研究基因

功能、疾病模型的建立、药物测试和治疗策略的评估。通过转基因技术,研究人员可以模拟人类疾病的遗传背景,以便更好地理解疾病的分子机制和探索潜在的治疗

方法。


构建转基因模型的关键步骤和技术

构建转基因模型通常包括以下几个关键步骤:

  1.目标基因的克隆和载体构建:首先需要克隆目标基因,并将其构建到适当的表达载体中,这个载体通常包含启动子、多克隆位点、选择标记等元素。

  2.转基因载体的传递:将构建好的转基因载体通过显微注射、脂质体介导、病毒介导等方法传递到动物的受精卵或胚胎干细胞中。

  3.筛选和繁育:通过分子生物学技术(如PCR、Southern blot)筛选含有外源基因的动物,并通过繁育产生转基因后代。

  4.表型分析:对转基因动物进行表型分析,以验证外源基因的表达和功能。


构建转基因模型中的技术难点和解决策略

在构建转基因模型过程中,技术难点可能包括外源基因的随机整合导致的基因表达不稳定、转基因效率低、以及转基因动物的表型分析复杂等。

为了克服这些难点,研究人员可以采取以下策略:

  1.使用条件性表达系统(如Cre-LoxP系统)来控制目标基因的时空特异性表达。

  2.优化显微注射技术或病毒介导的基因传递方法,提高转基因效率。

  3.结合使用分子标记和基因打靶技术,提高转基因的精确度和稳定性。


最新研究或技术进展

根据最新的研究,转基因技术正在不断进步,以提高模型的准确性和实用性。例如,有研究报道了使用CRISPR/Cas9技术在小鼠基因组的Rosa26位点插入特定基因

序列,建立了定点转基因小鼠模型,这种模型可以用于研究特定基因在肿瘤发生发展中的生物学功能。此外,还有研究开发了原位精准转基因技术,这种技术可以在

小鼠中实现转基因的单拷贝定点整合,构建组织特异性的小鼠嵌合体,用于功能研究,这表明转基因技术在构建复杂疾病模型方面取得了新的进展。

在构建转基因模型时,应特别关注最新的研究成果和技术改进,以确保模型的质量和研究的前沿性。


参考:

[1]董雨馨等, Rosa26-LEM4定点转基因小鼠模型构建. 南开大学学报(自然科学版), 2024. 57(1): 第40-44页.

[2]Kim, G.B., et al., Rapid Generation of Somatic Mouse Mosaics with Locus-Specific, Stably Integrated Transgenic Elements. Cell, 2019. 179(1): 

        p. 251-267.e24.

[3]   Zhu Y, Wang Y, Meng F. Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2015;36(3):221-224. doi:10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2015.03.010


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