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HE染色实验伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点(4.7—5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
iTRAQ:是一种相对和绝对定量的同位素标记技术,广泛应用于蛋白质组学研究中。iTRAQ技术通过标记蛋白质或肽段,实现蛋白质的定量分析,从而揭示蛋白质在生物过程中的动态变化。
免疫共沉淀:蛋白间相互作用是细胞各种基本功能的主要完成者,参与几乎所有的重要生命活动。因此,蛋白-蛋白相互作用研究以及建立相互作用的关系网络图,具有十分重要的意义,也是目前蛋白质研究领域的热点。
免疫沉淀实验:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
碱性磷酸酶染色:成骨细胞能够分泌碱性磷酸酶` `,合成Ⅰ型胶原、骨钙素等细胞外基质,从而进一步矿化形成骨组织,这些特征被作为鉴定骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的标准。
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