流式细胞术检测细胞周期1。实验原理用流式细胞仪检测细胞周期，通常用碘化丙啶（propidiumiodide，PI）染细胞核。PI在一定波长的光下发出荧光，其强度与DNA含量成正比。通过流式细胞仪分析各时期的细胞百分数，可检测细胞的增殖、凋亡。2。流式细胞仪检测A549细胞周期步骤收集对数生长期细胞，计数，以(1~5)×105/孔接种于6孔板，置37℃，5％CO2条件下培养过夜，使细胞贴壁。次日更换培养液，各孔分别加入含有0、80、400、2000、10000mg/L不同浓度茶...

1、炎症灶内主要是巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。单核吞噬细胞的浸润对慢性炎症十分重要。单核细胞从血管游出后转化为巨噬细胞。巨噬细胞还可被激活。在炎症灶局部巨噬细胞的积聚有三方面的原因：①由于从炎症灶不断产生吸引单核细胞的趋化因子，如C5a、纤维蛋白多肽、阳离子蛋白质及胶原和纤维粘连蛋白的分解产物等。因此，从血液循环中渗出的单核细胞源源不断来到局部，这是局部巨噬细胞的主要来源。②游出的巨噬细胞在局部通过有丝分裂而增殖，但巨噬细胞局部增殖的起始动因还不清楚。③炎症灶内的巨噬细胞...

激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多．包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种：自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(inducedfluorescence)及酶致荧光(enzymaticallyproducedfluorescence)等等。其中大部分荧光素的激发和发射波长均可在仪器自带软件的染料信息库中找到。1．观察步骤及仪器操作根据实验要求制备样品完毕后。即可进行观察。基本步骤如...

人非小细胞肺癌裸鼠原位种植转移模型的建立：（1）探讨肺癌远处转移和阻断其远处转移的研究；（2）模拟晚期非小细胞肺癌转移的自然发生过程；（3）在活体动物的完整器官内评估瘤细胞播散和肿瘤的生长。实验方法原理将表达GFP的质粒pRNAT-U6/Neo转染人肺腺癌细胞A549，G418筛选获得稳定表达GFP细胞，对比转染前后细胞的生长活性和成瘤性。将转染后细胞原位种植裸鼠预定标准处死。HE染色和免疫组化检测转移灶的位置和数目。利用KODAKIS2000MM系统检测肿瘤播散情况。实验材...

人胃癌高转移模型的建立可以：（1）研究肿瘤转移机制；（2）研究肿瘤防治；（3）为肿瘤转移研究提供更为理想的动物模型。肿瘤组织块原位移植法实验方法原理用人胃癌组织块SGC-7901原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴结和肝脏等器官转移，转移率达66.7%(2/3)，第6周末转移率高达*(10/10)。实验材料雄性SPF级SCID小鼠人胃癌组织SGC-7901试剂、试剂盒水合氯醛福尔马林液仪器、耗材饲养笼光学显微镜石蜡实验步骤一、实验材料准备1.雄性SPF级SCID小鼠，...

人胰腺癌裸小鼠模型实验方法原理将人胰腺癌细胞株8988接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养，HE染色。实验材料裸小鼠BALBcnu-nu胰腺癌细胞株8988试剂、试剂盒RPMI-1640*培养基胰酶戊二醛仪器、耗材CO2培养箱试管实验步骤一、实验材料准备裸小鼠BALB/cnu-nu，4～6周龄，体重16～20g，雌雄兼备，SPF级环境中饲养，恒温25～27℃，恒湿45...

试剂、试剂盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物仪器、耗材热循环仪实验步骤一、材料1.酶和酶缓冲液Taq聚合酶许多Taq聚合酶都可以用；作者发现Roche公司的Taq聚合酶可以满足大多数需要.如果需要提高PCR产物的特异性，应该使用热启动聚合酶。使用Tag聚合酶本身附带的缓冲液。2.核酸和寡核苷酸（1）溶于水的DNA如果DNA在TE中，应该在PCR反应混合物中添加MgCl2.如果用从石蜡包埋的组织中纯化的DNA做模板，选择的STR标记的大小应该是78~250bp,因为这些DNA模板...