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戊四氮(Pentylenetetrazole,PTZ)是一种高度敏感的化合物,有毒物质;小心处理。1.将2mg/mLPTZ溶解在无菌0.9%(w/v)NaCl中。在使用当天准备PTZ。2.对于野生型C57BL/6小鼠,试验建议剂量为30-35mg/kg。对PTZ的敏感性取决于使用的小鼠品系,注射剂量因实验目的而异。3.服用PTZ后观察动物行为30分钟,并对异常行为进行分类和评分。如果可能,观察动物24小时,或注射后至少再观察6-10小时,特别是在癫痫发作严重时得分达到3分或以...
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背景:颅脑外伤(TBI)是世界范围内威胁生命的疾病。大多数中国人由于运动受伤,办公室或家中意外摔倒以及摩托车受伤而患有TBI。由于社会对疾病的了解不多,因此TBI被称为“沉默流行病”。TBI后继发性脑损伤引起病理,生理和生物学反应,导致脑功能障碍。生物和化学过程通常触发连锁反应,可导致炎症细胞,能量缺乏,兴奋性毒性,细胞凋亡和氧化应激。氧化应激在上述过程中起重要作用。氧化会增强炎症和其他反应,因此促进炎症和其他反应会加剧氧化应激并形成恶性循环。氧化应激在TBI后一小时发生,并...
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目的:理解低氧预处置对子宫内膜异位症大鼠模型异位病灶构成的影响,藉此进一步说明EMs发作开展的分子机制,从而为其防治供新思绪。办法:Lewis雌性大鼠随机分为两组,分别给予HPC(8%O2)和常压常氧(21%O2)处置8h,随即取其子宫组织移植至正常大鼠腹壁。术后14d记载移植灶体积,并采用ELISA、免疫组化、Westernblot、RT-PCR和Tunnel法,对血清和腹腔液以及移植前子宫组织和移植病灶停止检测。结果:HPC可显著上调大鼠子宫血管内皮生长因子(VEGF)m...
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一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力,了解冻存和复苏的效果。用台盼兰染细胞,死细胞着色,活细胞不着色,从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应,也可测定细胞相对数...
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材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。3、第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不要倾斜。4、用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入...
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初代培养或原代培养,是从供体获取组织后的培养。组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理消化培养法合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细胞从培养液中摄取营养和排出代谢产物,细胞能较快地长成单层。本法尤适用于培养大量组织,细胞产量高;但用于经常性小量培养工作稍显繁琐,无菌操作不良时且易污染。实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液...
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原理:脑实质内注射胶原酶,胶原酶破坏血管的基底层,导致渗漏血液流入周围组织。动物:雄性SD大鼠,年龄10-12周,体重300-350g。麻醉期间,大鼠体温维持在37度,体温维持直到从麻醉状态苏醒,恢复正常运动为止。建模:大鼠麻醉,固定立体定位仪上,在头皮上做1cm长的中线切口。用棉签除去覆盖在大鼠头皮上的软组织,确认颅骨上的Bregma点位置。右侧钻孔的位置:Bregma点前0.6mm,侧面2.9mm,微量注射器进入基底节,深度距颅骨平面5.5mm。以0.1ul/min速度注...